Identificación de biomarcadores de diagnóstico no invasivos para embarazo ectópico utilizando datos

Scientific Reports volumen 12, número de artículo: 19992 (2022) Citar este artículo

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En la actualidad, el diagnóstico de embarazo ectópico depende principalmente de la ecografía transvaginal y de la β-hCG. Sin embargo, estos métodos pueden retrasar el tiempo de diagnóstico y tratamiento. Por lo tanto, nuestro objetivo fue detectar marcadores moleculares serológicos para el diagnóstico temprano del embarazo ectópico (EP). Utilizando proteómica de adquisición independiente de datos (DIA), se seleccionaron las proteínas diferenciales en el suero entre los grupos de embarazo intrauterino (IP) y EP. Luego, los niveles de expresión de estas proteínas diferenciales se midieron mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. El valor diagnóstico de los biomarcadores séricos se evaluó mediante el análisis de la curva característica operativa del receptor. GSTO1, ECM-1 y β-hCG mostraron diferencias significativas entre los grupos EP e IP (P <0,05). La combinación de GSTO1/ECM-1/β-hCG tuvo un área bajo la curva de 0,93 (IC 95% 0,88–0,99), una sensibilidad de 88,89% (IC 95% 73,94–96,89) y una especificidad de 86,11% (95 % IC 70,50–95,33) con un índice de probabilidad de 6,40. La combinación de GSTO1/ECM-1/β-hCG puede convertirse en un posible enfoque para el diagnóstico temprano de EP.

El embarazo ectópico (PE) se define como un embarazo que ocurre fuera del útero, más comúnmente en una trompa de Falopio, también puede ocurrir en un ovario, la cavidad abdominal y el cuerno uterino1. La prevalencia del embarazo ectópico se estima en un 2% de todos los embarazos, siendo una causa importante de mortalidad en las mujeres embarazadas2. En la actualidad, todavía representa el 6% de las morbilidades asociadas al embarazo3. Los síntomas típicos del embarazo ectópico son el cese de la menstruación, dolor abdominal repentino y sangrado vaginal4. En casos graves, puede producirse síncope, shock e incluso la muerte4. Por ello, el diagnóstico y tratamiento precoz del embarazo ectópico es especialmente importante. En la actualidad, el diagnóstico de embarazo ectópico depende principalmente de la ecografía transvaginal y de la medición cuantitativa de la subunidad β de la gonadotropina coriónica humana (β-hCG)5. Sin embargo, en la práctica, una paciente sólo acude al médico después de dolor abdominal y sangrado vaginal, lo que retrasa fácilmente el tiempo de diagnóstico y tratamiento. Además, los métodos de diagnóstico actuales deben realizarse en el hospital, queremos desarrollar un método de detección temprana para embarazos ectópicos que pueda usarse en casa, para reducir en gran medida el daño del embarazo ectópico. Por lo tanto, la alerta temprana y un mejor diagnóstico de El embarazo ectópico son cuestiones urgentes.

En los últimos 20 años, los investigadores han estado buscando marcadores serológicos del embarazo ectópico, pero hasta ahora se han logrado pocos avances debido a diversas dificultades. En la actualidad, la β-hCG sigue siendo el marcador sérico más utilizado en la práctica clínica, pero un único nivel sérico de β-hCG sólo puede reflejar el embarazo, pero no su ubicación. Por lo tanto, la β-hCG sérica no es adecuada para el diagnóstico de embarazo ectópico.

Para diagnosticar mejor el embarazo ectópico se han realizado varios estudios y se han identificado varios indicadores, como porcentajes de progesterona, VEGF, inhibina A, activina A o una combinación de progesterona, β-hCG, CA125 y células T CD3+6. . En 2007, Florio et al. informaron por primera vez que la activina A puede usarse para predecir embarazos ectópicos7. Cuando el límite de detección se fijó en 0,37 ng/ml, la sensibilidad y especificidad fueron del 100% y 99,6%, respectivamente. Sin embargo, el resultado no fue confirmado en estudios confirmatorios posteriores. Yan et al. informaron que la sensibilidad y especificidad de la adrenomedulina (ADM) en la detección de embarazo ectópico fueron sólo del 53,50% y 85,00%, respectivamente8. Sin embargo, estos factores tienen una viabilidad limitada debido a resultados contradictorios o baja sensibilidad y especificidad.

La adquisición independiente de datos (DIA) es una técnica proteómica cuantitativa emergente que permite realizar perfiles de proteínas rápidos y sensibles a partir de mezclas complejas. Esta detección proporciona una identificación y cuantificación inequívocas de todos los lípidos (tanto picos abundantes bajos como altos). La utilización de nuevas funciones de escaneo y flujos de trabajo de procesamiento de datos DIA representa un cambio de paradigma en las expectativas asociadas con el análisis proteómico cuantitativo9. El objetivo de este estudio fue detectar marcadores moleculares serológicos de embarazo ectópico con la aplicación de proteómica cuantitativa basada en adquisición independiente de datos (DIA).

En este estudio, reclutamos a 36 mujeres con embarazo ectópico y 36 mujeres con embarazo temprano normal como controles después de la evaluación clínica, β-hCG y examen de ultrasonido vaginal. La información demográfica y las características clínicas se proporcionan en la Tabla 1. Los resultados del embarazo incluyeron 36 (50,0%) IP viables y 36 (50,0%) EP. Veintisiete PE (75,0%) se colocaron en las trompas de Falopio y nueve (25,0%) en incisiones uterinas. Ambos grupos de mujeres se encontraban en las primeras etapas del embarazo y no se observaron diferencias significativas en términos de edad y edad gestacional (P > 0,05), que estuvo determinada por el primer día del último período menstrual. Además, los niveles de β-hCG fueron mensurables en todas las muestras y fueron significativamente (P <0,001) más bajos en el grupo EP que en el grupo IP (Tabla 1).

Los biomarcadores potenciales en las muestras de suero para evaluar la actividad se seleccionaron mediante proteómica de adquisición independiente de datos (DIA). Como se muestra en la Fig. 1, en las 5 muestras evaluadas, cada muestra tiene múltiples puntos positivos. Las intensidades de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B y ECM-1 en las muestras de suero del grupo EP fueron significativamente diferentes de las del grupo IP. Estos resultados indican que estos marcadores serológicos pueden ser objetivos útiles para el diagnóstico de EP.

Gráfico de volcán (A) y mapa de calor de grupo (B) de las proteínas expresadas diferencialmente entre el grupo IP y EP.

La expresión de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero se midió mediante ELISA (n = 36). Como se muestra en la Fig. 2, los niveles de expresión de GSTO1 fueron significativamente mayores en pacientes con EP que en pacientes con embarazo normal (P = 0,01). Aunque CLEC3B no mostró diferencias entre EP e IP, el nivel de expresión de CLEC3B en TEP disminuyó significativamente (P = 0,04). Curiosamente, las concentraciones de ECM-1 en EP y TEP fueron significativamente más bajas que las de IP (P <0,001). Los niveles de β-hCG fueron significativamente más bajos en los embarazos EP y TEP que en los embarazos normales (P <0,001). No hubo diferencias estadísticamente significativas en TSP1, INHBC o CLEC3B entre los tres grupos.

Concentraciones de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero de mujeres IP y EP. Los datos se presentan como media ± desviación estándar.

El análisis de subgrupos según la edad gestacional (< 50 vs. ≥ 51 días) mostró que los niveles de GSTO1 fueron significativamente más altos en pacientes con EP cuya edad gestacional ≥ 51 días en comparación con pacientes con IP cuya edad gestacional ≥ 51 días (P = 0,01) y pacientes con PE cuya edad gestacional <50 días (P = 0,02). Las concentraciones de ECM-1 en pacientes con EP cuya edad gestacional fue <50 días fueron significativamente más bajas que las de las pacientes con IP (P = 0,01). También se observaron los mismos niveles más bajos de ECM-1 en pacientes con EP cuya edad gestacional fue ≥ 51 días (P <0,001). Además, las concentraciones de β-hCG de las pacientes con EP cuya edad gestacional ≥ 51 días fueron menores que las de las pacientes con IP cuya edad gestacional ≥ 51 días (P = 0,001) (Fig. 3).

Análisis de subgrupos de concentraciones de TSP1, GSTO1, INHBC, CLEC3B, ECM-1 y β-hCG en suero de mujeres IP y EP según edad gestacional (< 50 vs. 51 días). Los datos se presentan como media ± desviación estándar.

Se utilizó la curva ROC para evaluar la sensibilidad/especificidad, el valor predictivo positivo/negativo, el índice de probabilidad (LR) y el área bajo la curva (AUC) de GSTO1, INHBC, β-hCG y diferentes combinaciones como pruebas diagnósticas. La Tabla 2 y la Fig. 4 demuestran la importante capacidad discriminatoria del aumento de GSTO1, ECM-1, β-hCG y diferentes niveles de combinación para el diagnóstico de EP.

Curvas características operativas del receptor de GSTO1, ECM-1 y β-hCG.

En detalle, GSTO1 en el punto de corte de 4343 pg/ml logró una sensibilidad del 63,89 % (intervalo de confianza (IC) del 95 %, 46,22–79,18) y una especificidad del 69,44 % (IC del 95 %, 51,89–83,65) como suero único. marcador para la predicción de PE (AUC: 0,70 (IC del 95 %, 0,58–0,82)), con un LR de 2,09. Cuando se utilizó una concentración de ECM-1 de 4732 pg/ml como punto de corte para el diagnóstico de EP en el grupo de control, la sensibilidad fue del 72,22 % (IC del 95 %: 54,81–85,80), la especificidad fue del 75,00 % (IC del 95 %: 54,81–85,80). , 57,80–87,88) como marcador sérico único para la predicción de PE (AUC: 0,82 (IC del 95 %, 0,72–0,91)), y el LR fue 2,89. La β-hCG con el punto de corte de 24 300 mUI/ml logró una sensibilidad de 80,56 % (IC 95 %, 63,98–91,81) y una especificidad de 77,78 % (IC 95 %, 60,85–89,88). El AUC de β-hCG fue de 0,83 (IC del 95 %: 0,74 a 0,93), con un LR de 3,63. Al combinar todos los factores, construimos la fórmula y = (0,0003*GSTO1)-(0,001*ECM1)-(0,00003*hCG) + 3,518. La detección combinada de estos tres marcadores serológicos tuvo un AUC de 0,93 (IC del 95 %, 0,88–0,99), una sensibilidad del 88,89 % (IC del 95 %, 73,94–96,89) y una especificidad del 86,11 % (IC del 95 %, 70,50– 95,33) con un LR de 6,40.

Dado que el diagnóstico de embarazo ectópico es un desafío clínico en la edad gestacional temprana, cómo explorar un biomarcador para simplificar y mejorar el diagnóstico de embarazo ectópico es un foco de investigación. Algunos estudios demostraron que no existe un único biomarcador de diagnóstico para el embarazo ectópico tubárico que tenga ha sido probado adecuadamente y arroja resultados satisfactorios10. El uso de análisis de múltiples marcadores séricos podría ser una posible solución para el diagnóstico de EP. En este estudio, encontramos que GSTO1, ECM-1 y β-hCG pueden ser marcadores serológicos para el diagnóstico temprano de EP, especialmente cuando se combinan los tres factores, con la mejor sensibilidad y especificidad.

Cada marcador que elegimos es biológicamente plausible. La glutatión transferasa (GST) es una gran familia de transferasas que está relacionada con la progresión de tumores y el metabolismo de objetos extraños (como los contaminantes ambientales)11. Se ha confirmado que el omega-GST 1 existe ampliamente en una variedad de tejidos y tiene la actividad de una variedad de enzimas biológicas, especialmente aquellas involucradas en la biotransformación del arsénico12,13,14. Algunos estudios han encontrado que existe una relación estadística entre el aborto recurrente y la mutación GSTO1 durante el embarazo. Además, especularon que esta relación está relacionada con el cambio en la actividad de la ascorbato reductasa y el metabolismo del arsénico causado por la mutación GSTO115. En un estudio sobre la relación entre el embarazo y GSTO1, también se encontró que GSTO1 estaba relacionado con la restricción del crecimiento intrauterino fetal16,17. En este estudio, encontramos que durante más de 51 días de embarazo, los niveles de GSTO1 en los grupos IP y EP fueron significativamente diferentes, pero la sensibilidad y especificidad de la diferencia no fueron altas.

La proteína de matriz extracelular 1 (ECM-1) es una glicoproteína que generalmente actúa como una proteína central de unión funcional e interactúa con una variedad de proteínas para regular la angiogénesis y el crecimiento tumoral18. Por ejemplo, la interacción de ECM-1 con la metaloproteinasa de matriz 9 (MMP9), el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), CX3CL1 y CCL14 está implicada en la aparición y desarrollo de muchas enfermedades19,20,21. Graubner et al. propusieron que se puede observar una gran cantidad de ECM1 en el epitelio endometrial en las primeras etapas del embarazo, lo que puede estar relacionado con la decidualización y la preparación para la implantación22. A medida que avanza el embarazo, la cantidad de ECM-1 cambia en consecuencia, lo que sugiere que ECM-1 desempeña un papel importante en el mantenimiento del embarazo y el desarrollo fetal23,24. Hannan et al. descubrió que CX3CL1 y CCL14 promueven la migración del trofoblasto al comienzo del embarazo mediante la regulación de ECM-120. Por lo tanto, exploramos la relación entre ECM-1 y EP y encontramos una diferencia significativa entre el grupo IP y el grupo EP, lo que sugiere la posibilidad de ECM-1 en el diagnóstico de EP temprana.

Otros marcadores del desarrollo del embarazo fueron menos significativos. La trombospondina-1 (TSP-1) es un índice sensible para monitorear la activación plaquetaria in vitro25. Los estudios han demostrado que la expresión de TSP-1 tiene cierta relación con el embarazo y el nivel de expresión en diferentes tejidos musculares es diferente en diferentes etapas del embarazo, lo que asegura la formación normal de vasos sanguíneos durante el embarazo y mantiene la estabilidad de los vasos sanguíneos. cama26,27. La inhibina beta C (INHBC) pertenece a la familia del factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), existe ampliamente en la placenta y el endometrio y tiene un efecto antiproliferación celular28,29,30. Abdoli et al. y Fortés et al. señalaron que el gen INHBC está involucrado en la herencia de rasgos reproductivos de ovejas y bovinos31,32, y algunos estudiosos también señalaron que INHBC está involucrado en el proceso de implantación de blastocistos33. El miembro B de la familia 3 del dominio de lectina tipo C (CLEC3B) es una proteína de unión que tiene un efecto de unión específico sobre el plasminógeno kringle-434. Rocha et al. propusieron que el feto puede estimular la secreción de CLEC3B durante el embarazo, por lo que CLEC3B tiene un papel en el diagnóstico del embarazo temprano35. Desafortunadamente, en este estudio no encontramos una diferencia significativa en estos tres marcadores entre el grupo IP y el grupo EP, pero se necesitan más estudios.

Como indicador serológico de EP más utilizado, la β-hCG desempeña un papel muy importante en el diagnóstico del embarazo ectópico temprano. A menudo, los niveles bajos de β-hCG pueden sospechar la posibilidad de EP, pero la β-hCG por sí sola no confirma ni descarta EP, lo que fue consistente con nuestros resultados experimentales36,37,38. Aunque hubo diferencias significativas entre el grupo IP y el grupo EP, la sensibilidad y especificidad de la β-hCG para el diagnóstico de EP fueron deficientes, y GSTO-1 y ECM-1 mostraron los mismos resultados. Sin embargo, cuando se combinaron β-hCG, GSTO-1 y ECM-1, tanto la sensibilidad como la especificidad aumentaron significativamente, lo que sugiere la posibilidad de un diagnóstico temprano de EP.

Debido al éxito limitado de las mediciones de biomarcadores séricos únicos, varios investigadores han comenzado a investigar la posibilidad de utilizar el análisis de varios marcadores para diagnosticar el embarazo ectópico tubárico. O'Leary et al. examinó los niveles de progesterona y β-hCG y encontró, en estudios preliminares, que una β-hCG plasmática < 3000 UI/l y una progesterona plasmática < 40 nmol/l podrían predecir un embarazo ectópico tubárico con una sensibilidad del 88% y una especificidad del 82%. %39. Un estudio retrospectivo analizó a 289 mujeres en el servicio de urgencias a las que se les diagnosticó EP, aborto espontáneo o embarazo intrauterino viable, y los investigadores recogieron las concentraciones séricas de progesterona, hCG y activina A de estas pacientes y realizaron análisis estadísticos40. Sus hallazgos sugieren que los límites de progesterona (< 10 ng/ml), hCG (< 6.699 UI/l) y activina A (< 0,26 ng/ml) se optimizaron mediante análisis ROC, y el panel de marcadores múltiples que utilizó los tres biomarcadores tuvo una sensibilidad del 70% y una especificidad del 69%40. Nuestro estudio también confirma estos hallazgos de que combinar varios marcadores en una sola prueba proporciona mejores diagnósticos que las proteínas individuales. Además, los resultados de nuestro estudio fueron similares a los de los estudios anteriores en términos de sensibilidad y especificidad.

Hay limitaciones en este experimento. En primer lugar, estos hallazgos se consideran preliminares y muchos de los análisis no se utilizan de forma rutinaria en la práctica clínica. La validación externa de planes futuros se llevará a cabo en un conjunto separado de muestras. En segundo lugar, el tamaño de nuestra muestra es relativamente pequeño, lo que puede provocar desviaciones en los resultados. Se sugiere utilizar un tamaño de muestra mayor en futuras investigaciones. Además, los resultados de varias proteínas en el grupo IP y el grupo EP mostraron poca diferencia, lo que puede no aplicarse al índice de examen clínico rápido.

En conclusión, el presente estudio revela que GSTO1/ECM-1/β-hCG en suero pueden ser biomarcadores potencialmente útiles para el diagnóstico temprano de EP, lo que debería confirmarse en estudios con tamaños de muestra más grandes. Esperamos presentar el resultado de esta investigación a proporcionar inspiración para investigadores posteriores en el diseño de la investigación y las ideas de investigación.

En el grupo de EP, los criterios de inclusión incluyeron 4 a 12 semanas de embarazo, dolor abdominal, sangrado y otros síntomas clínicos, y diagnóstico de EP confirmado mediante ecografía transvaginal (incluido embarazo tubárico, embarazo con cicatriz de incisión uterina y embarazo en cuerno uterino). Se excluyeron las mujeres con antecedentes de menopausia y aumento de β-hCG sérica pero sin diagnóstico confirmado por ecografía o mejoría después del tratamiento conservador. En el grupo de embarazo intrauterino (IP), los criterios de inclusión incluyeron 4 a 12 semanas de embarazo, sin dolor abdominal, sangrado u otros síntomas clínicos y yema fetal uterina confirmada mediante ecografía. Se registraron datos clínicos de todas las pacientes, incluida la edad, la edad gestacional, la concentración sérica de β-hCG, la concentración de progesterona y el diagnóstico clínico. Este estudio fue aprobado por los Comités de Ética del Segundo Hospital de China Occidental de la Universidad de Sichuan (n.° 124) y todos los pacientes firmaron formularios de consentimiento informado.

Se recogieron de 2 a 3 ml de una muestra de sangre venosa periférica de pacientes con EP e IP en hospitales de tercer grado A. Las muestras se centrifugaron a 1000 rpm a 4 °C durante 10 min, y el suero se separó, envasó y almacenó a -80 °C hasta su uso. Todas las muestras fueron seleccionadas de individuos Han no relacionados.

Se utilizaron diez muestras de suero (de 5 pacientes con EP y 5 pacientes con IP) para realizar una detección proteómica mediante adquisición independiente de datos (DIA). Todas las muestras seleccionadas fueron emparejadas por edad y edad gestacional (consulte la Tabla 1 complementaria).

La primera etapa es la extracción de muestras y el control de calidad. Primero, se agregaron 10 µl de suero de cada muestra (que contenía inhibidores de tripsina) a la suspensión de resina en la columna a temperatura ambiente (RT). Después de mezclar, la columna se colocó en el rotador y se hizo girar durante 1 h. En segundo lugar, con el fondo y la tapa retirados, la columna se colocó en un tubo EP de 2 ml y se centrifugó a 1000 g durante 2 min a 4 °C. En tercer lugar, después de eliminar las 12 proteínas principales en abundancia del plasma, las muestras eluidas se reservaron mediante liofilización al vacío. La muestra liofilizada se añadió a 100 µl de SDS para su redisolución y posteriormente se centrifugó a 12.000 g durante 10 minutos a temperatura ambiente. El sobrenadante fue la solución de proteínas totales, cuya concentración se determinó mediante el método del ácido bicinconínico (BCA). Finalmente, cada muestra (8 µg) se separó mediante electroforesis en gel de poliacrilamida SDS al 12% (SDS-PAGE). Después de eso, los geles separados se tiñeron con tinción azul brillante de Coomassie y posteriormente se lavaron con agua destilada hasta que el fondo quedó claro. Para el control de calidad, los geles se escanearon mediante ImageScanner, que se utilizó para juzgar si eran posibles experimentos de seguimiento según las imágenes.

La segunda etapa es el experimento DIA. Primero, después de la cuantificación de proteínas, se colocó una muestra de 30 μg en un tubo de ultrafiltración y se hizo reaccionar con 120 μl de tampón reductor (DTT 10 mM, urea 8 M, TEAB 100 mM; pH 8,0) a 60 °C durante 1 h. Después de la reacción, se añadió IAA hasta que la concentración final fue de 50 mM y el tiempo de reacción fue de 40 min a temperatura ambiente sin luz. La solución en el fondo del tubo colector se descartó después de centrifugación a 12.000 rpm a 4 °C durante 20 min. Después de eso, se agregaron 100 µl de tampón (TEAB 300 mM) al tubo y se centrifugaron dos veces a 12.000 rpm durante 20 minutos. Después de reemplazar el tubo de recolección, se agregaron 100 μl de tampón (TEAB 300 mM) y 2 μl de solución de tripsina de grado de secuenciación (1 μg/μl) al tubo de ultrafiltración y se hicieron reaccionar a 37 °C durante 12 h. Los péptidos después de la enzimólisis se recogieron después de centrifugación a 12.000 rpm durante 20 min. Posteriormente, se agregaron 50 µl de tampón (TEAB 200 mM) al tubo y se centrifugaron a 12.000 rpm durante 20 min. La solución en el fondo del tubo se recogió y liofilizó. En segundo lugar, después de la enzimólisis y la liofilización, los péptidos se redisolvieron con 1 ml de TFA al 0,1 % y se desalinizaron con una columna de extracción en fase sólida (SPE) RP-C18. En tercer lugar, para el análisis LC-MS/MS, la muestra estándar IRT y la muestra a analizar se mezclaron según una proporción de volumen de 1:10 y se realizó un análisis de espectrometría de masas.

Después de la separación de fases líquidas con pH alto y la espectrometría de masas líquidas, los péptidos enzimolizados de cada muestra se recolectaron por separado en la computadora y se estableció una biblioteca espectral utilizando el software Spectreonaut Pulsar X para el análisis de datos. La prueba t se realizó en los valores repetidos de cada grupo para calcular el cambio y el valor de P de cada grupo de comparación, y luego se realizó una selección de dos estándares (cambio = 1,2, valor de P <0,05). Las proteínas (cambio de veces> 1,2 o <5/6, valor de P <0,05) se consideraron proteínas expresadas de manera significativamente diferencial, que se enumeran y marcan con colores.

La verificación de muestras grandes de las proteínas (cambio de veces> 1,2, valor de P <0,01) se realizó mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) utilizando kits comerciales adquiridos de RayBiotec, Inc. (Norcross, GA), R&D Systems (Minneapolis, MN) y Abbexa, Inc. (Pekín, China). Los experimentos se realizaron siguiendo los procedimientos sugeridos por el fabricante.

Concentraciones de trombospondina-1 (TSP1), glutatión S-transferasa omega-1 (GSTO1), inhibina cadena beta C (INHBC), tetranectina (CLEC3B), proteína 1 de la matriz extracelular (ECM-1) y β-hCG en el suero de Las mujeres IP y EP se presentan como media ± desviación estándar. La prueba t se realizó para muestras independientes de los dos grupos según los resultados de verificación ELISA, y un valor de P <0,05 se consideró estadísticamente significativo. Se realizó la prueba de Hosmer-Lemeshow para evaluar el grado de calibración del modelo de predicción. La curva ROC se realizó con GraphPad Software (San Diego, CA) y se calcularon el área bajo la curva (AUC), la sensibilidad, la especificidad, el valor predictivo positivo y el valor predictivo negativo para evaluar el valor diagnóstico de la PE.

Todos los sujetos dieron su consentimiento informado para su inclusión antes de participar en el estudio. El estudio se realizó de acuerdo con la Declaración de Helsinki y el protocolo fue aprobado por el Comité de Ética del Segundo Hospital de China Occidental de la Universidad de Sichuan (no.124).

Todos los conjuntos de datos generados para este estudio están disponibles en el artículo.

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Estos autores contribuyeron igualmente: Dan Ma y Ruiqing Yang.

Departamento de Medicina de Rehabilitación, Segundo Hospital Universitario de China Occidental, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Dan Ma

Facultad de Medicina de China Occidental de la Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Dan Ma, Ruiqing Yang, Yunlong Chen, Zhengyi Huang y Yuxin Shen

Laboratorio clave de defectos congénitos y enfermedades relacionadas de mujeres y niños (Universidad de Sichuan), Ministerio de Educación, Chengdu, Sichuan, China

Dan Ma

Centro del Departamento de Medicina de Rehabilitación, Hospital de China Occidental, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Chengqi él

Laboratorio clave de medicina de rehabilitación en la provincia de Sichuan, Chengdu, China

Chengqi él

Laboratorio Estatal Clave de Enfermedades Bucales, Centro Nacional de Investigación Clínica de Enfermedades Bucales, Chengdu, Sichuan, China

Lixing Zhao

Departamento de Ortodoncia, Hospital de Estomatología del Oeste de China, Universidad de Sichuan, Chengdu, Sichuan, China

Lixing Zhao

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DM y RY redactaron el manuscrito. RY y YC realizaron los procedimientos de laboratorio. ZH realizó el análisis estadístico. YS recopiló y analizó datos. CH y LZ diseñaron, revisaron el experimento y revisaron críticamente el manuscrito. Todos los autores revisaron el manuscrito.

Correspondencia a Chengqi He o Lixing Zhao.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Reimpresiones y permisos

Ma, D., Yang, R., Chen, Y. et al. Identificación de biomarcadores de diagnóstico no invasivos para el embarazo ectópico mediante proteómica de adquisición independiente de datos (DIA): un estudio piloto. Informe científico 12, 19992 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-23374-8

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Recibido: 23 de abril de 2022

Aceptado: 31 de octubre de 2022

Publicado: 21 de noviembre de 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-23374-8

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